圖1. Illumina GAIIx
測序原理:
測序時將基因組DNA的隨機片段附著到光學透明的玻璃表面(即Flow cell),這些DNA片段經(jīng)過延伸和橋式擴增后,在Flow cell上形成了數(shù)以億計Cluster,每個Cluster是具有數(shù)千份相同模板的單分子簇。然后利用帶熒光基團的四種特殊脫氧核糖核苷酸,通過可逆性終止的SBS(邊合成邊測序)技術(shù)對待測的模板DNA進行測序。這種新方法確保了高精確度和真實的一個堿基接一個堿基的測序,排除序列方面的特殊錯誤,為同聚物和重復序列的測序提供了一個很好的解決方案。
性能特點:
• 測序通量高:每個測序反應能達到90G以上的數(shù)據(jù)通量; • 準確率高: ≥ 98.5%,同時也有效地解決了多聚重復序列的讀取問題; • 低成本:比傳統(tǒng)毛細管測序技術(shù)成本的1%還低; • DNA序列的讀取長度不斷增加,當前達到300 bp; • 可以進行Pair-End雙向測序,目前Pair-End文庫插入片段大小范圍可由200bp到10kb; • 每張芯片有8個通道,每個通道可單獨測序一個樣品,也可以把多個樣品混合在一起測序。
應用領(lǐng)域:
• 全基因組測序(重測序) • BAC重測序 • 轉(zhuǎn)錄組測序 • 宏基因組測序 • 基因表達譜 • 小RNA測序 • ChIP-Seq測序 |