本方法非常適合單個位點大量樣品的已知SNP的基因分型研究。
技術方法:
此技術是由美國Life technologies公司研發(fā)的SNP分型技術,其技術原理如下簡介。PCR 反應時,加入一對兩端有不同熒光標記的特異探針來識別不同的等位基因(allele1和allele2),5’端為報告熒光基團(reporter),3’端為淬滅熒光基團 (quencher)。PCR過程中,兩個探針能與正向引物和反向引物之間的互補序列特異退火結合。當探針以完整形式存在時,由于能量共振轉移,熒光基團只發(fā)出微弱熒光。特異的探針與相應的等位基因雜合后,DNA聚合酶發(fā)揮5’到3’外切酶活性,把報告熒光基團切割下來,脫離了3’端淬滅熒光基團的淬滅作用 (quench),從而發(fā)出熒光。兩個探針的5’端標有不同的熒光 (FAM或VIC),3’端標有MGB 淬滅基團結合體。根據檢測到的不同熒光,可以判斷相應的樣本的SNP 等位基因型。 整個技術的示意圖如下: 應用領域: 本方法適用于多個涉及到SNP分型的遺傳研究領域。尤其適合針對全基因組SNP關聯研究獲得的初步陽性位點,以及全基因組測序得到的大量初篩突變位點進行進一步的大樣品驗證研究。
檢測對象:
基因組DNA 服務內容:
檢測實例:
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